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    生化實(shí)驗(yàn)基本操作技術(shù)

    發(fā)布時(shí)間: 2010-05-05  點(diǎn)擊次數(shù): 2553次

    :玻璃儀器的洗滌及干燥:
    (一) 意義:去除干擾物,提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。
    (二) 常用洗滌劑:
    1. 洗衣粉,肥皂,洗潔精,去污粉----用于一般去污。
    2. 強(qiáng)酸,強(qiáng)堿,尿素------去除蛋白質(zhì),核酸。
    3. 鉻酸洗液------見附2。
    4. 水(自來水,蒸餾水)------用來沖洗容器。
    (三) 洗滌方法:
    * 洗滌程序:泡→洗(→泡)→沖→漱
    1. 新儀器的洗滌:
    2%的鹽酸浸泡數(shù)小時(shí)→自來水沖凈→洗滌劑溶液中浸泡過夜→試管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器內(nèi)外壁→自來水沖10 遍→蒸餾水漱洗
    內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
    2. 非定量敞口儀器的洗滌(試管、燒杯等)用后立即放入洗滌劑溶液或清水中浸泡過夜→試管刷蘸肥皂、洗衣粉或去污粉擦洗容器內(nèi)外壁→自來水沖10 遍→檢查是否洗凈→蒸餾水漱洗內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
    注意:檢查毛刷頂部是否裸露,洗刷時(shí)用力不可過猛,以免戳破玻璃儀器。
    3.窄口儀器的洗滌(容量瓶、試劑瓶)
    使用后立即在洗滌劑溶液或清水中浸泡過夜→洗滌劑溶液倒入容器內(nèi)(約1/4)→小心轉(zhuǎn)動(dòng)或搖動(dòng)儀器→自來水沖10 遍→檢查是否洗凈→蒸餾水涮洗內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
    4.刻度吸管的洗滌
    使用后立即用大量自來水沖洗(切勿使樣品干在管內(nèi),否則難以洗凈)→干燥后放入鉻酸洗液中浸泡過夜→取出,在特制的容器中用自來水沖洗30 分鐘→蒸餾水涮洗內(nèi)壁3 遍→包裝、消毒→干燥備用。
    (四) 判斷洗凈的標(biāo)準(zhǔn):
    洗凈的玻璃儀器管壁光潔、清亮,無污漬;被水濕潤后,管壁呈現(xiàn)均勻水膜,無掛水珠。
    (五)干燥方法
    1、 晾干:儀器倒立放在特制架子上,自然晾干。
    2、 烘干:盡量倒凈儀器內(nèi)部的水,將其倒立放在托盤上,放入烘箱烘干。普通儀器用80-100℃,容量分析儀器用37-40℃。
    3、 有機(jī)溶劑干燥:體積小的容器急需干燥時(shí),可用此法。洗凈的儀器先用少量酒精洗一次,再用少量丙酮或乙醚洗滌,吹干(不必加熱)。

    二:吸管和微量移液器的使用及注意事項(xiàng):
    (一) 刻度吸管:
    1. 作用:用于準(zhǔn)確移取一定體積的溶液。
    2. 規(guī)格(ml):0.1,0.2,0.5,1.0,2.0,5.0,10.0。
    3. 注意事項(xiàng):
    1) 使用前:
    ① 觀察吸管有無破損,污漬。
    ②觀察吸管的規(guī)格:所用吸管的規(guī)格應(yīng)等于或近似等于所要吸取的溶液的體積。
    ③觀察有無“吹”字:若有,說明刻度到,放液后需將的溶液吹出,否則不吹。
    2) 握法:拇指和中指夾拄吸管,食指游離。
    3) 取液:①垂直入液 ②入液深度適中 ③洗耳球吸取 ④取液高度高于刻度2-3cm ⑤食指按緊吸管
    上端⑥刻度吸管提離液面⑦觀察液內(nèi)無氣泡⑧濾紙擦凈管壁。
    4) 放液至刻度:①刻度吸管垂直②右眼與刻度線平行③輕輕松開食指(轉(zhuǎn)動(dòng)刻度吸管),使液面緩慢降低,直至zui低點(diǎn)與刻度線相切。
    5) 放液至容器:①刻度吸管垂直②容器傾斜45℃③使溶液自然流入容器,注意吹與不吹。
    6) 一根吸管只吸取一種試劑,用后立即浸入水中。
    (二) 微量移液器
    1、 作用:
    用于準(zhǔn)確移取一定體積的溶液,尤其是較小體積
    的溶液(<100ul)。
    2、 規(guī)格:
    固定式、可調(diào)式;單道、多道
    1,2,10,20,100,200,1000(單位:ul)
    3、 注意事項(xiàng):
    1) 使用前:
    ①連續(xù)按壓數(shù)次,以調(diào)節(jié)空氣。
    ②調(diào)節(jié)體積至所需的刻度。
    ③接上Tip 頭,注意密封。
    2) 握法:手掌握住器液器,拇指按壓。
    3) 取液:①輕壓拇指至*停點(diǎn) ②垂直握持移液器,使Tip 頭浸入溶液 ③預(yù)洗一次 ④緩慢松開按鈕,吸取溶液⑤等一秒鐘,將移液器提離液面,擦去Tip 頭外液滴。
    4) 放液:①Tip 頭貼住容器內(nèi)壁 ②平穩(wěn)地把按鈕壓至*停點(diǎn),等1 秒鐘再壓至第二停點(diǎn)③提起移液器,Tip 頭貼容器壁擦過④松開按鈕。
    5) 如吸取不同溶液必需更換Tip 頭。

    三:電動(dòng)離心機(jī)的使用:
    (一) 作用:分離密度不同的物質(zhì)。
    (二)分類:低速離心機(jī) <4000rpm
    高速離心機(jī) 6000-20000rpm
    超速離心機(jī) >20000rpm
    (三) 使用:
    1、 開機(jī):
    ① 將待離心溶液倒入大小適中的離心管中(溶液量不應(yīng)超過離心管總體積的2/3)
    ② 離心管連同管套一起放在粗天平上平衡(管套底部應(yīng)放置橡皮墊)
    ③ 對(duì)稱放入離心機(jī)插孔中(不用的管套應(yīng)拿出),蓋緊上蓋。
    ④ 開關(guān)置于“關(guān)”,調(diào)速桿置于zui小(逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)至轉(zhuǎn)不動(dòng),接通電源,打開開關(guān),緩慢啟動(dòng)。
    ⑤ 用調(diào)速桿沿順時(shí)針方向緩慢調(diào)速,觀察轉(zhuǎn)速,達(dá)到轉(zhuǎn)速后開始計(jì)時(shí)。
    2、 關(guān)機(jī):
    ① 用調(diào)速桿將沿逆時(shí)針方向緩慢降速,關(guān)掉開關(guān),切斷電源。
    ② 停轉(zhuǎn)后打開上蓋,輕輕取樣。
    ③ 離心管套倒立放置,使其干

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