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ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些？
發(fā)布時間： 2023-06-28 點擊次數(shù)： 1196次ELISA實驗的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標(biāo)記，其中，結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學(xué)活性，酶標(biāo)記的抗原或抗體既保留其免疫學(xué)活性，又保留酶的活性。進(jìn)行檢測時，樣品中的受檢物質(zhì)(抗原或抗體）與固定的抗體或抗原結(jié)合。通過洗板除去非結(jié)合物，再加入酶標(biāo)記的抗原或抗體，此時，能固定下來的酶量與樣品中被檢物質(zhì)的量相關(guān)。通過加入與酶反應(yīng)的底物后顯色，根據(jù)顏色的深淺可以判斷樣品中物質(zhì)的含量，進(jìn)行定性或定量的分析。由于酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應(yīng)的結(jié)果，使測定方法達(dá)到很高的靈敏度。
那么ELISA試劑盒需把握的關(guān)鍵有哪些？
1.在儲存及孵育過程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。一切試劑瓶蓋須蓋緊以避免蒸發(fā)和污染，試劑避免受到微生物的污染，因為蛋白水解酶的干擾將導(dǎo)致呈現(xiàn)錯誤的結(jié)果。
2.小心汲取試劑并嚴(yán)格遵守給定的孵育時刻和溫度。請注意在汲取標(biāo)本/規(guī)范品，酶結(jié)合物或底物時，di一個孔與一個孔加樣之間的時刻距離假如太大，將會導(dǎo)致不同的 “預(yù)孵育"時刻，然后明顯地影響到測量值的準(zhǔn)確性及重復(fù)性。
3.試劑盒保存：部分試劑保存于-20℃，部分試劑保存于2-8℃，具體以標(biāo)簽上的標(biāo)示為準(zhǔn)。
4.濃洗滌液會有鹽分出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。
5.剛敞開的酶聯(lián)板孔中可能會含有少許水樣物質(zhì)，此為正常現(xiàn)象，不會對試驗結(jié)果造成任何影響。
6.一切的樣品都應(yīng)管理好，依照規(guī)則的程序處理樣品和檢測設(shè)備。