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研域教您一抗/二抗該怎么選?
發(fā)布時(shí)間： 2019-09-06 點(diǎn)擊次數(shù)： 1997次我們?cè)谏钪薪?jīng)常會(huì)面臨做選擇這樣的一個(gè)難題，其實(shí)做選擇本身并不是多么困難的事情，關(guān)鍵在于您是否了解自己內(nèi)心真正需要的是什么。就好比我們的實(shí)驗(yàn)者在選擇產(chǎn)品的品牌、質(zhì)量、規(guī)格等，根據(jù)這些信息再去做相關(guān)的判斷。比如zui簡(jiǎn)單的一個(gè)例子，不少的伙伴都對(duì)一抗、二抗的選擇方面甚是苦惱，那如何選擇呢，研域教您！
擇一抗宿主物種
通常，當(dāng)使用偶聯(lián)二抗檢測(cè)未偶聯(lián)一抗時(shí)，產(chǎn)生抗體的宿主動(dòng)物物種就顯得非常重要。對(duì)于免疫組織化學(xué)，產(chǎn)生一抗的物種應(yīng)盡可能與樣品物種不同。這是為了避免抗免疫球蛋白的二抗與樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白間發(fā)生潛在交叉反應(yīng)性。更為恰當(dāng)?shù)倪x擇是來(lái)源于兔的一抗，然后是偶聯(lián)于檢測(cè)分子的抗兔IgG二抗。如果可提供偶聯(lián)一抗，則可避免此問(wèn)題。對(duì)于使用不包含內(nèi)源性免疫球蛋白的樣品的其它技術(shù)，宿主物種的選擇則不那么重要。
組織裂解物和組織培養(yǎng)物上清液包含免疫球蛋白。對(duì)還原、變性樣品進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡時(shí)，IgG會(huì)以50和25kDa的條帶顯現(xiàn)，這兩個(gè)條帶分別對(duì)應(yīng)于IgG分子的重鏈和輕鏈。選擇二抗
二抗應(yīng)來(lái)源于與所使用一抗相同的物種。例如，如果您的一抗為小鼠單克隆抗體，那么就需選抗小鼠二抗。我們推薦您查看二抗的數(shù)據(jù)表以確保它已在您將要使用的應(yīng)用中進(jìn)行了測(cè)試。抗體數(shù)據(jù)表列出了已經(jīng)過(guò)測(cè)試并證明行之有效的應(yīng)用。如果未列出某項(xiàng)應(yīng)用，并不表示該抗體不適于該應(yīng)用。它只是表示尚未經(jīng)過(guò)測(cè)試并且抗體表現(xiàn)如何未知。當(dāng)應(yīng)用已經(jīng)過(guò)測(cè)試并證明無(wú)效時(shí)，數(shù)據(jù)表上會(huì)加以說(shuō)明。